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BaculovirusInsect ExpressionSystem
桿狀病毒-昆蟲表達(dá)系統(tǒng)
桿狀病毒-昆蟲表達(dá)系統(tǒng)

桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)(Baculovirus expression vector system,BEVS),憑借其穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系、高表達(dá)水平及翻譯后修飾功能而被普遍認(rèn)可為是一種表達(dá)大規(guī)模蛋白的強(qiáng)有力的工具。BEVS可以同時(shí)表達(dá)多個(gè)外源基因,在分泌生物活性蛋白的同時(shí)增加產(chǎn)量,還可以提供高活性的重組蛋白,解決在其它體系中無法解決的蛋白活性困難。  

服務(wù)優(yōu)勢(shì)

高表達(dá)水平:能夠?qū)崿F(xiàn)高水平的蛋白質(zhì)表達(dá),可達(dá)到昆蟲細(xì)胞的天然表達(dá)水平。

大容量表達(dá)載體:桿狀病毒表達(dá)載體具有較大的容量,可容納較大的目標(biāo)蛋白質(zhì)基因。

蛋白質(zhì)折疊和修飾能力:桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)具有昆蟲細(xì)胞的蛋白質(zhì)折疊和修飾機(jī)制,可實(shí)現(xiàn)復(fù)雜蛋白質(zhì)的正確折疊和修飾。

翻譯后修飾:昆蟲細(xì)胞能夠進(jìn)行正確的翻譯后修飾,如糖基化和脂負(fù)載。

適用于多種昆蟲細(xì)胞:桿狀病毒可以感染多種昆蟲細(xì)胞,包括昆蟲細(xì)胞系和昆蟲體內(nèi)的細(xì)胞。

服務(wù)內(nèi)容如下
服務(wù)項(xiàng)目內(nèi)容交期
全基因合成分析基因序列,優(yōu)化密碼子,合成目的基因,提供載體1-2周
重組質(zhì)粒的構(gòu)建選用合適的載體,合適的標(biāo)簽(eg:His,GST,Fc,SUMO)構(gòu)建重組供體質(zhì)?!皃fastbacⅠ-target”(target代表目標(biāo)基因)1周
重組桿粒的制備轉(zhuǎn)化重組供體質(zhì)粒至DH10bac感受態(tài)細(xì)胞,藍(lán)白斑篩選陽性克隆并使用PCR反復(fù)鑒定,最后堿裂解小提重組桿粒1周
細(xì)胞轉(zhuǎn)染復(fù)蘇并傳代懸浮培養(yǎng)的SF21細(xì)胞,使用化學(xué)轉(zhuǎn)染試劑將重組桿粒轉(zhuǎn)染入SF21細(xì)胞以制備P1代重組桿狀病毒1周
重組蛋白的表達(dá)利用P1代桿狀病毒制備P2代病毒、利用P2代病毒侵染大規(guī)模培養(yǎng)的SF21細(xì)胞以表達(dá)重組蛋白1周
重組蛋白的分離純化及QC檢測(cè)選用合適的色譜方法(eg:親和、離子、分子篩等)分離純化重組蛋白,并超濾換液至客戶指定的緩沖液(如無特殊要求最終的保存緩沖液選擇PBS或Tris-HCl)。QC檢測(cè)包括:SDS-PAGE電泳檢測(cè)重組蛋白純度、BCA定量重組蛋白的濃度、Western-blot檢測(cè)1周